Métodos Avanzados de Cromatografía Líquida
Cromatografía Iónica
- Intercambiadores aniónicos: Atraen aniones con grupos cargados positivamente (+)
- Intercambiadores catiónicos: Atraen cationes con grupos cargados negativamente (-)
Rellenos de Intercambio Iónico
- Copolimeros de síntesis: Compresibles y con baja velocidad de difusión
- Sílices modificadas: Mayor velocidad de difusión
- Resinas peliculares: Película delgada soportada en microesferas
Tipos de Cromatografía Iónica
- Con una columna: Detección conductimétrica o fotométrica indirecta
- Con una columna supresora: Elimina el fondo conductivo
Cromatografía de Pares Iónicos
- Convierte analitos iónicos en moléculas neutras polares
- Utiliza surfactantes aniónicos o sales de amonio cuaternario
Cromatografía de Exclusión Iónica
- Separa especies parcialmente ionizadas
- Los iones se repelen de resinas con la misma carga
Detección en Cromatografía Iónica
- Conductividad: Todos los iones
- Amperometría: Sustancias ionizables oxidables o reducibles
- Absorción UV: Iones absorbentes
- Absorción UV con derivatización: Reacción postcolumna para formar especies absorbentes
- Indirecta por absorción UV: Disminución de la absorción cuando se eluye el analito
Cromatografía de Exclusión Molecular
- Separa moléculas según su tamaño
- Las moléculas pequeñas penetran los poros de la fase estacionaria
Detectores de Exclusión Molecular
- Índice de refracción
- UV
- Dispersión de luz
Tipos de Exclusión Molecular
- Filtración en gel: Para biopolímeros en soluciones acuosas concentradas
- Permeación en gel: Para polímeros en disolventes orgánicos
Determinación de Pesos Moleculares
- Relación entre el logaritmo del peso molecular y el volumen de elución
Cromatografía de Afinidad
- Aísla compuestos específicos mediante enlaces específicos con la fase estacionaria
- Se utiliza en bioquímica para purificación
