Identificación de Carbohidratos, Lípidos y Proteínas: Pruebas de Laboratorio

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Identificación de Carbohidratos

Procedimiento experimental:

Prueba de Benedict (identificación de azúcares reductores)

  1. 5 tubos de ensayo c/u con 0,5ml de glucosa, fructosa, lactosa, sacarosa y almidón.
  2. Añadir 1 ml de reactivo de Benedict y mezclar.
  3. Baño María por 5min, precipitado color rojo ladrillo (reacción positiva).

Prueba de Barfoed (diferenciar monosacáridos de disacáridos reductores)

  1. 5 tubos de ensayo c/u con 0,5ml de glucosa, fructosa, lactosa, sacarosa y almidón.
  2. Añadir 1ml de reactivo de Barfoed y mezclar.
  3. Agua hirviente por 2min, precipitado color rojo (reacción positiva a monosacáridos reductores).

Prueba de Bial (identificar pentosas y polisacáridos de pentosas)

  1. 8 tubos de ensayo c/u con 0,5ml de arabinosa, glucosa, fructosa, galactosa, maltosa, lactosa, sacarosa y almidón.
  2. Añadir 2ml de reactivo de Bial y mezclar.
  3. Baño María fuerte por 2min, color azul verdoso (reacción positiva).

Prueba de Seliwanoff (diferenciar cetosas de aldosas)

  1. 5 tubos de ensayo c/u con 0,5ml de glucosa, fructosa, lactosa, sacarosa y almidón.
  2. Añadir 1ml de reactivo de Seliwanoff y mezclar.
  3. Baño María 30-60seg, color rosa fuerte (reacción positiva a cetosas).

Hidrólisis de un polisacárido (fracciona polímero en monosacáridos y disacáridos)

  1. 2 tubos de ensayo con 1ml de almidón.
  2. Tubo 1: 2ml de ácido sulfúrico H2SO4 y mezclar, baño María por 20min, tubo 2 a temperatura ambiente.
  3. Enfriar y añadir 1ml de hidróxido de sodio NaOH, mezclar.
  4. Añadir 1ml del reactivo de Benedict, baño María por 5min, tubo 1 color rojo ladrillo (reacción positiva), tubo 2 sin reacción.

Identificación de Lípidos

Procedimiento experimental:

Solubilidad

  1. 5 tubos de ensayo c/u con 2ml de aceite vegetal, añadir en c/u agua destilada, etanol, etanol caliente, acetona e isopropanol.
  2. Dejar en reposo por 2min.
  3. Registrar cambios.

Tinción

  1. 2 tubos de ensayo con 2ml de aceite vegetal.
  2. Tubo 1: 5ml de Sudán 3, tubo 2: 5ml de rojo 40.
  3. Reposo y registrar cambios.

Identificación de instauraciones

  1. Tubo 1: 2ml de agua destilada y 1 gota de aceite.
  2. Tubo 2: 2ml de aceite y una gota de lugol.
  3. Registrar cambios.

Propiedades de las Proteínas

Procedimiento experimental:

Prueba de Biuret

  1. 6 tubos de ensayo c/u con 1ml de: agua destilada, seralbúmina humana, almidón, galactosa, caseína y agua peptonada.
  2. Añadir 4 gotas del reactivo de Biuret, colocar en superficie blanca.
  3. En presencia de proteínas la solución es color violeta.